Cerebrospinal fluid challenges for the diagnosis of herpes simplex infection in the central nervous system / Desafios do exame do líquido cefalorraquidiano para o diagnóstico de infecção por herpes simplex no sistema nervoso central

Abstract Herpes simplex virus (HSV) is a cause of a severe disease of the central nervous system (CNS) in humans. The demonstration of specific antibodies in the cerebrospinal fluid (CSF) may contribute to the retrospective neurological diagnosis. However, the commercial immunological tests for HSV infection are for use in serum samples. Objective: The aim of the present study was to adapt a commercial kit anti-HSV IgG used for serum samples to be performed with a CSF sample. Methods: Forty CSF specimens from 38 patients with suspected CNS HSV infection were serially diluted for detecting anti-HSV IgG by enzyme immunoassay (EIA). The same samples were also analyzed with the polymerase chain reaction (PCR). Results: The sensitivity of EIA test for HSV was 5% (dilution 1:40) and 65% (dilution 1:2) in CSF, and HSV DNA PCR was 15%. The combined analysis of EIA (dilution 1:2) and PCR increased the sensitivity up to 72.5%. The inflammatory CSF was associated with positive HSV PCR. Conclusions: We demonstrated the importance to adapt serological anti-HSV IgG EIA test for CSF assays to increase the accuracy of the analysis, considering the low concentration of specific antibodies in CSF.

Resumo O vírus herpes simples (HSV) é um dos agentes causadores de uma doença grave no sistema nervoso central (SNC) em humanos. A detecção de anticorpos específicos no líquido cefalorraquidiano (LCR) pode contribuir para o diagnóstico neurológico retrospectivo. Entretanto, os testes imunológicos comerciais são para uso em amostras de soro. Objetivo: Adaptar um kit comercial sorológico anti-HSV IgG para ser utilizado no de LCR. Metodos: Quarenta amostras de LCR de 38 pacientes com suspeita de infecção por HSV no SNC foram diluídas pesquisa de anticorpos anti-HSV IgG pelo método imunoenzimático (EIA). Além disso, as mesmas amostras também foram analisadas por reação em cadeia da polimerase (PCR). Resultados: A sensibilidade do teste EIA para o HSV consistiu em 5% (diluição 1:40) e 65% (diluição 1:2) no LCR, e o PCR do DNA do HSV, 15%. A análise combinada de EIA (diluição 1:2) e PCR aumentou a sensibilidade para 72,5%. Houve associação entre presença do LCR inflamatório e PCR positiva para HSV. Conclusões: Demonstramos a importância na adaptação previa do teste sorológico anti-HSV IgG EIA para ensaios do no LCR, a fim de aumentar a acuracia da análise, considerando a baixa concentração de anticorpos específicos no LCR.

Diagnosis of human herpes virus 1 and 2 (HHV-1 and HHV-2): use of a synthetic standard curve for absolute quantification by real time polymerase chain reaction

The use of quantitative real time polymerase chain reaction (qPCR) for herpesvirus detection has improved the sensitivity and specificity of diagnosis, as it is able to detect shedding episodes in the absence of clinical lesions and diagnose clinical specimens that have low viral loads. With an aim to improve the detection and quantification of herpesvirus by qPCR, synthetic standard curves for human herpesvirus 1 and 2 (HHV-1 and HHV-2) targeting regions gD and gG, respectively, were designed and evaluated. The results show that synthetic curves can replace DNA standard curves in diagnostic herpes qPCR.

Herpes simplex labialis virus is a risk factor for vitiligo [post- herpes simplex labialis vitiligo]

Herpes simplex labialis is a common disease and is the major cause of erythema multiforme. Recently post-herpes labialis leukoderma had been noticed on the lips of Iraqi patients. The aim of the present work is to assess this new pigmentary problem. A total of 24 patients with post-herpes labialis leukoderma were included in this study. Full history and a thorough physical examination were done for all patients. Fourteen females [58.37%] and 10 males [41.67%] were studied. Their ages ranged between 7-53 years. Koebner phenomenon was positive in 17 [70.83%] patients. Family history of vitiligo in close relatives was positive in 13 [54.17%] of patients. The findings of the present work are in favor that this type of leukoderma is a variant of vitiligo that may be induced by herpes-simplex labialis.

Seroprevalencia contra agentes ToRCH en mujeres indígenas en edad fértil, estado Zulia, Venezuela / Prevalence of infectious agents in indigenous women of childbearing age in Venezuela

Introducción. El termino ToRCH comprende a los patógenos Toxoplasma gondii, virus de la rubéola, citomegalovirus y virus herpes simple 1 y 2. En mujeres embarazadas expuestas pueden ser causa de abortos y malformaciones congénitas en el neonato. Objetivo. Determinar la seroprevalencia de infección por los agentes causantes del síndrome ToRCH en mujeres en edad fértil de algunas comunidades indígenas yukpa de Venezuela. Materiales y métodos. En el año 2007 fueron seleccionadas 109 muestras de 151 mujeres, en edades comprendidas entre 14 y 40 años. La detección de anticuerpos se hizo por el método de inmunoensayo enzimático indirecto o ELISA de Smartest Diagnostics™. Resultados. El 85,5 % presentó anticuerpos contra T. gondii, el 95,4 % para rubéola, el 75,2 % para citomegalovirus y el 97,2 % para el virus herpes simple 1 y 2. Se observa que el 21,1 % y el 30,2 % presentaron relación entre la variable aborto y las infecciones por citomegalovirus y virus herpes simple 1 y 2, respectivamente. Conclusiones. Existe alta seroprevalencia de infecciones por los agentes causantes del síndrome ToRCH en mujeres en edad fértil de la etnia indígena yukpa. Las condiciones sanitarias precarias y el consumo de agua contaminada con ooquistes, favorecen la adquisición de la infección por T. gondii. El hacinamiento, el inicio a temprana de edad de la actividad sexual y el número de parejas, pueden incidir en la presencia de citomegalovirus y virus herpes simple 1 y 2.

Introduction. The ToRCH syndrome includes the following infectious pathogens: Toxoplasma gondii, rubella, cytomegalovirus and herpes simplex virus 1 and 2. In susceptible pregnant women, these pathogens can cause abortions and congenital malformation in the newborn babies. Objective. The seroprevalence of infection by ToRCH agents was determined in women of childbearing age in several Venezuelan Yukpa indigenous communities. Material and methods. In 2007, 109 samples were selected from 151 women with an age range of 14 to 40 years old. The determination of antibodies against ToRCH agents was carried out through the indirect enzyme immunoassay technique by ELISA´s technique of Smartest Diagnostics. Results. Of the 109 samples, 85.5% presented antibodies against T. gondii, 95.4% for rubella, 75.2% for cytomegalovirus and 97.2% for and herpes simplex virus 1 and 2. A relationship between abortion and infection by cytomegalovirus and herpes simplex virus 1and 2 was noted in 21.1% and 30.2% of women presented, respectively. Conclusions. The findings show a high prevalence of ToRCH agents in women in childbearing age in Yukpa indigenous communities in Venezuela. Poor sanitary conditions and consumption of water contaminated with oocysts may be an important way of transmission of T. gondii. Overcrowding in the communities, sexual activity at an early age and number of partners and may be related to the presence of cytomegalovirus and herpes simplex virus HSV-1 and 2.

Ativação da resposta imune inata mediada por receptores do tipo toll em infecção por vírus herpes simplex tipo 1(HSV-1) em modelo murino / Activation of the innate immune response mediated by toll receptors type in infection herpes simplex virus type 1 (HSV-1) in murine model

Este trabalho foi realizado no laboratório de Imunopatologia do Centro de Pesquisa RenéRachou (CPqRR) e no Laboratório de Vírus (Labvirus) da Universidade Federal de MinasGerais (UFMG). Os herpesvirus possuem genoma DNA e são envelopados.Aproximadamente 70% dos adultos já tiveram contato com Herpes Simplex tipo 1 (HSV-1).O HSV-1 causa úlceras ou até mesmo lesões mais graves como encefalite, e após a infecção,o vírus comumente fica latente e pode ser ou não reativado. Células do sistema immuneinato, através dos “Receptores do Tipo Toll” (TLRs), reconhecem “padrões molecularesassociados a patógenos” (PAMPs) orquestrando a resposta imune contra o vírus. Quando ativados, TLRs iniciam uma cascata de sinalização que culmina na ativação de genesrelacionados à defesa imune inata (óxido nítrico-NO, citocinas e quimiocinas). Outros estudosdo grupo mostraram que animais nocautes (KO) para TLR9 ou TLR2/9 apresentam altamortalidade na infecção por HSV-1, ao contrário dos C57BL/6 selvagens (WT) e TLR2KO,que são capazes de controlar o vírus. Objetivamos pesquisar a interrelação na expressão dosTLRs 1, 2, 3, 6, 7 e 9 em animais TLR2 KO, TLR9 KO e TLR2/9 KO infectados por HSV-1e principais citocinas, células e mecanismos imune celulares contra infecção por HSV-1. Nopresente trabalho camundongos WT, TLR2KO, TLR9KO e TLR2/9KO foram infectados viaintranasal com 106 u.f.p. de HSV-1, e seus controles receberam PBS. A eutanásia dos animaisfoi realizada no 5º dia após infecção (dpi), que previamente já foi demonstrado ser o pico dainfecção neste modelo, e então gânglios trigêmeos (TG) e cérebros foram coletados. Aexpressão de TLRs 1, 2, 3, 6, 7 e 9 foi avaliada por PCR em Tempo Real. Camundongos WTinfectados apresentaram diferença significativa na expressão destes TLRs comparados comseus respectivos controles no TG, mas não no cérebro. Nos KOs, houve aumento da expressãodos TLRs tanto nos TGs (mas com níveis mais moderados comparado aos WT) quanto noscérebros. Também foi avaliada a expressão de gp91phox, p22phox e iNOS. A expressão de iNOSem C57BL/6 WT infectados foi maior que nos outros grupos, mas o mesmo não ocorreu paragp91phox, p22phox. Adicionalmente, foi mensurada a produção de NO por macrófagosintraperitoneais, através da reação de Griess, que demonstrou maior produção por macrófagosWT, comparados aos grupos TLR KOs. Ensaios de histopatologia e imunofluorescênciademonstraram maior celularidade nos TGs infectados, além de confirmar a presença de CD8,macrófagos, e aumento da produção de iNOS nos C57BL/6 WT infectados, o que não ocorreucom os camundongos TLRs KO. Em ensaio de sobrevivência com C57BL/6 WT, CCL3 KO,CD8 KO, RAG KO e iNOS KO a importância das células T e do iNOS foi confirmada, umavez que CD8 KO, RAG KO e iNOS KO tiveram 0% de sobrevida. Camundongos C57BL/6WT, RAG KO, CCL3 KO e iNOS KO tiveram seus TGs analisados por PCR em tempo realpara verificar a expressão do gene viral VP-16 e MCP-1, iNOS, IP-10, Rantes e TNF- no 5ºdpi. Estes dados indicaram a relevância de iNOS e das célúlas T na resposta inata contra oHSV-1, uma vez que os RAG KO foram irresponsivos à expressão das citocinas, enquanto osiNOS KO apresentaram uma resposta exacerbada das mesmas. Ensaio de citometria indicouque IFN produzido pelas células T CD8, nos TGs, e produzido pelas células T CD4 eNatural Killer (NK), nos linfonodos regionais, são um possível mecanismo de controle contraa infecção de HSV-1 dos animais WT infectados. Hipotetizamos que a expressão coordenadade TLRs reflete na orquestração eficiente do sistema imune inato, através da produçãoequilibrada de quimiocinas e citocinas e da atividade imune celular adequada, com produçãode NO por macrófagos e ação de células T CD8, T CD4 e NK controlando a infecção porHSV-1.

Ativação da Resposta Imune Inata Mediada por Receptores do Tipo Toll em Infecção por Vírus Herpes Simplex tipo 1(HSV-1) em Modelo Murino

Este trabalho foi realizado no laboratório de Imunopatologia do Centro de Pesquisa RenéRachou (CPqRR) e no Laboratório de Vírus (Labvirus) da Universidade Federal de MinasGerais (UFMG). Os herpesvirus possuem genoma DNA e são envelopados.Aproximadamente 70% dos adultos já tiveram contato com Herpes Simplex tipo 1 (HSV-1).O HSV-1 causa úlceras ou até mesmo lesões mais graves como encefalite, e após a infecção,o vírus comumente fica latente e pode ser ou não reativado. Células do sistema immuneinato, através dos “Receptores do Tipo Toll” (TLRs), reconhecem “padrões molecularesassociados a patógenos” (PAMPs) orquestrando a resposta imune contra o vírus

Quandoativados, TLRs iniciam uma cascata de sinalização que culmina na ativação de genesrelacionados à defesa imune inata (óxido nítrico-NO, citocinas e quimiocinas). Outros estudosdo grupo mostraram que animais nocautes (KO) para TLR9 ou TLR2/9 apresentam altamortalidade na infecção por HSV-1, ao contrário dos C57BL/6 selvagens (WT) e TLR2KO,que são capazes de controlar o vírus. Objetivamos pesquisar a interrelação na expressão dosTLRs 1, 2, 3, 6, 7 e 9 em animais TLR2 KO, TLR9 KO e TLR2/9 KO infectados por HSV-1e principais citocinas, células e mecanismos imune celulares contra infecção por HSV-1. Nopresente trabalho camundongos WT, TLR2KO, TLR9KO e TLR2/9KO foram infectados viaintranasal com 106 u.f.p. de HSV-1, e seus controles receberam PBS. A eutanásia dos animaisfoi realizada no 5º dia após infecção (dpi), que previamente já foi demonstrado ser o pico dainfecção neste modelo, e então gânglios trigêmeos (TG) e cérebros foram coletados. Aexpressão de TLRs 1, 2, 3, 6, 7 e 9 foi avaliada por PCR em Tempo Real. Camundongos WTinfectados apresentaram diferença significativa na expressão destes TLRs comparados comseus respectivos controles no TG, mas não no cérebro. Nos KOs, houve aumento da expressãodos TLRs tanto nos TGs (mas com níveis mais moderados comparado aos WT) quanto noscérebros. Também foi avaliada a expressão de gp91phox, p22phox e iNOS. A expressão de iNOSem C57BL/6 WT infectados foi maior que nos outros grupos, mas o mesmo não ocorreu paragp91phox, p22phox. Adicionalmente, foi mensurada a produção de NO por macrófagosintraperitoneais, através da reação de Griess, que demonstrou maior produção por macrófagosWT, comparados aos grupos TLR KOs

Ensaios de histopatologia e imunofluorescênciademonstraram maior celularidade nos TGs infectados, além de confirmar a presença de CD8,macrófagos, e aumento da produção de iNOS nos C57BL/6 WT infectados, o que não ocorreucom os camundongos TLRs KO. Em ensaio de sobrevivência com C57BL/6 WT, CCL3 KO,CD8 KO, RAG KO e iNOS KO a importância das células T e do iNOS foi confirmada, umavez que CD8 KO, RAG KO e iNOS KO tiveram 0% de sobrevida. Camundongos C57BL/6WT, RAG KO, CCL3 KO e iNOS KO tiveram seus TGs analisados por PCR em tempo realpara verificar a expressão do gene viral VP-16 e MCP-1, iNOS, IP-10, Rantes e TNF- no 5ºdpi. Estes dados indicaram a relevância de iNOS e das célúlas T na resposta inata contra oHSV-1, uma vez que os RAG KO foram irresponsivos à expressão das citocinas, enquanto osiNOS KO apresentaram uma resposta exacerbada das mesmas. Ensaio de citometria indicouque IFN produzido pelas células T CD8, nos TGs, e produzido pelas células T CD4 eNatural Killer (NK), nos linfonodos regionais, são um possível mecanismo de controle contraa infecção de HSV-1 dos animais WT infectados. Hipotetizamos que a expressão coordenadade TLRs reflete na orquestração eficiente do sistema imune inato, através da produçãoequilibrada de quimiocinas e citocinas e da atividade imune celular adequada, com produçãode NO por macrófagos e ação de células T CD8, T CD4 e NK controlando a infecção porHSV-1

Neumonía fatal en una niña inmunocompetente, asociada a herpes simple tipo 1 / Fatal pneumonia associated to herpes simplex 1, in an immunocompetent girl

Most reported cases of lower respiratory tract infection due to herpes simplex virus type-1 (HSV-1) occurs in immunocompromised patients, however there are few cases of viral infection in inmunocompentes critically ill patients (1-3). Objective: Report the case of fatal VHS-1 pneumonia in an immunocompetent patient. Case: A ten year old girl, immunocompetent, who presents respiratory symptoms and progresses rapidly to severe hypoxemia, instability and death. Lung biopsy reported Cowdry type A inclusions and the polimerasa chain reaction (PCR) was positive for HSV-1. We discuss the clinical features, diagnosis, treatment and prognosis in critically ill immunocompetent patients with HSV-1 infection in lower respiratory tract.

La mayoría de los casos reportados de infección por el virus herpes simplex tipo-1 (VHS-1) en el tracto respiratorio inferior ocurren en pacientes inmunosuprimidos; sin embargo, se han reportado casos de aislamiento del virus en pacientes inmunocompentes en estado crítico. Objetivo: Reportar el caso de neumonía grave y fatal por VHS-1 en un paciente inmunocompetente. Caso Clínico: Paciente de 10 años, sexo femenino, inmu-nocompetente, que inicia síntomas respiratorios y progresa rápidamente a hipoxemia severa, inestabilidad y muerte. La biopsia pulmonar reportó inclusiones de Cowdry tipo A y una reacción en cadena de la polimerasa (PCR) positiva para VHS-1. Discusión: Se comenta el cuadro clínico, diagnóstico, tratamiento y pronóstico en pacientes inmunocompetentes críticamente enfermos con infección por VHS-1 en el tracto respiratorio inferior.

Incidencia del virus herpes simplex en pacientes con infecciones agudas del sistema nervioso central / Incidence of herpes simplex virus infection in patients with acute central nervous system infections

Los Virus Herpes Simple son responsables de una variedad de infecciones a nivel de mucosas bucal y genital, son neurotrópicos, capaces de alojarse en células nerviosas y permanecer latentes con subsecuentes reactivaciones, en algunos casos pueden provocar meningitis y encefalitis. tienen una morbilidad significativa y una mortalidad elevada. El presente estudio tiene como objetivo determinar la incidencia de VHS en la etiología de los síndromes agudos del SNC mediante la detección en suero y LCR de anticuerpos específicos. Se estudiaron 93 muestras pareadas de pacientes con afecciones neurológicas que mostraron resultados negativos en el estudio bacteriológico de LCR y cuya relación Alb-LCR/Alb-suero fue <0,0075. Los anticuerpos fueron detectados por el método de inmunoensayo enzimático Elisa: Enzygnost® anti virus VHS/IgM-IgG (Behring, 1994), donde 1,2% (1/93) de las muestras de suero resultaron positivas para IgM; 89,24% (83/93)de los sueros resultaron positivos para IgG; y 27,39% (20/93) de las muestras de LCR presentaron anti-IgG positivo. La presencia de IgG en LCR sugiere la producción intratecal de estos anticuerpos en el SNC, lo que muestra una participación importante de este agente viral en las infecciones y enfermedades asociadas al SNC

Herpes simplex viruses are agents responsible for a variety of infections on buccal and genital mucosa; they are neurotropic, capable of lodging in the nerve cells and remaining latent with subsequent reactivations; in some cases, they can provoke meningitis and encephalitis; and they have a significant morbidity and are associated with a high mortality. The present project aims to determine HSV’s effect on the etiology of acute central nervous system (CNS) syndromes using the detection of specific antibodies in serum and cerebrospinal fluid. The 93 paired samples from patients with neurological affectations studied demonstrated negative results in the LCR bacteriological study and their Alb-LCR/Alb-serum relation was < 0.0075. Antibodies were detected by the enzymatic immunoassay ELISA method, where 1.2% (1/93) of the serum samples turned out positive for IgM; 89.24% (83/93) of the serum samples resulted positive for IgG; and 27.39% (20/93) of LCR samples were positive for anti-IgG. IgG presence in LCR suggested the intrathecal production of these antibodies inside the CNS, which demonstrates a significant participation by this viral agent in infections and diseases associated with the CNS

Caso para diagnóstico / Case for diagnosis

Desde as primeiras descrições da aids, no início da década de 1980, a infecção herpética é vista como uma das doenças oportunistas mais prevalentes em pacientes com retrovirose. A infecção pelo herpes-vírus simples tipo 2, agente etiológico de 60 a 90 por cento dos casos de herpes genital, é bastante comum em pacientes com aids. O acometimento mucocutâneo pelo herpes-vírus simples tipo 2 pode ser grave e prolongado (persistente por mais de um mês), sendo caracterizado como doença definidora de aids.

Since the first reports and descriptions of AIDS in the early 1980s, herpetic infection has been considered as one of the most prevalent and opportunistic aids related infections in patients with retroviral diseases Infection by Herpes simplex type 2 (HSV-2), the etiologic agent responsible for 60 percent to 90 percent of the cases of genital herpes, is very common among patients suffering from AIDS. Herpes simplex type 2 infection may cause severe and prolonged (over a period of time of one month) mucocutaneous onset of the disease, being characterized as an aids defining clinical condition.

Human herpes simplex virus infections: epidemiology, pathogenesis, symptomatology, diagnosis, and managemenT

Eight of the more than 80 known herpesviruses are human pathogens. Human herpes simplex virus (HSV) is a contagious infection with a large reservoir in the general population. It has a potential for significant complications in the immunocompromised host. In addition, psychological distress caused by the negative stigma associated with genital herpes and visible facial lesions in those experiencing frequent outbreaks renders it a challenging clinical dilemma. This article reviews the epidemiology, pathogenesis, and diagnostic features of HSV infections, providing the clinician with an up-to-date understanding of the available management strategies for mucocutaneous HSV-induced disease.

Characteristics of a macrophage culture persistently infected with herpes simplex virus type 1

Background. Persistence of herpes simples type 1 (HSV-1) has been reported in sensory neurons, corneal epithelium, and lymphosytes, although other cell types such as macrophages should also be considered as hosts for HSV-1 persistence. Here we report the establishment and characterization of HSV-1 persistence in an immortalized murine macrophage-like cell line (P388D1). Methods. The persistently HSV-1 infected culture (P388D1per) was obtained from surviving PO388D1 macrophages infectes with HSV-1 MP strain at multiplicity of 0.001. P388D1per was characterized by: extracellular production of viruses, cells expressing viral antigens, and cells releasing inctious viruses. Viral plaque size and cytophatic effect were determined in viruses (HSV A and HSV B) obtained from two different P388D1per passages. Host and virual proteins were detected in P388D1per and in P388D1 cells infected with HSV-1 by metabolic [35S]-methionine lebeling assays. Results. P388D1per culture was characterised by cyclic production of infectious viruses from non-detectable to 10-6 TCID50/mL; from 0.008 to 12.5 percent. Differences in viral plaque size and cytophatic effect morphology between HSV A, HSV B and HSV-1 were observed. Similar patterns of viral protein were observed in P388D1per and in P388D1 infected with HSV-1. Nonetheless, the characteristic interference effect of HSV-1 on host protein synthesis was not observed in P388D1per culture. Conclusions. An HSV-1 persistently infected immortalized macrophage culture was established and characterized. Virus produced during presistence showed phenotypic alterations with respect to the original virus. P388D1per cell protein synthesis was not affected by the presence of HSV-1

Detecciòn de anticuerpos para el virus del Herpes simple tipo 1 y 2 (VHS 1 y 2), por el mètodo de Elisa en trabajadoras del sexo / Annual reports 1996 / detection of antibodies for herpes simplex virus 1 and 2 by the Elisa method in sex workers

Las tècnicas màs comùnmente utilizadas para el diagnòstico de la infecciòn por el virus del herpes simple (VHS) son: aislamiento del virus en cultivo de tejidos, examinaciòn citològica, ensayos serològicos como inmunofluorescencia indirecta, radioinmunoanàlisis, fijaciòn de complemento, hemaglutinaciòn indirecta y el mètodo de ELISA. Los ensayos serològicos mencionados podrìan distinguir infecciones por VHS-1 del 2. El objetivo de este trabajo fue determinar la presencia de anticuerpos de tipo IgG e IgM para el VHS-1 y 2, utilizando una tècnica de ELISA, en trabajadoras del sexo. Para tal efecto fueron estudiadas 56 trabajadoras del sexo, provenientes de las ciudades de Encarnaciòn, Edelira y Ayolas. El 78,5 por ciento de la poblaciòn en estudio presentò anticuerpos contra el virus VHS-1 y el 91 por ciento para el VHS-2. El 71 por ciento presentò anticuerpos del tipo IGG y el 74,1 por ciento del tipo IgM para ambos serotipos virales, respectivamente. Nuestros hallazgos podrìan indicar o una especificidad del mètodo de ELISA utilizado para la discriminaciòn del VHS-1 del 2 o la existencia de co-infecciòn en las mujeres estudiadas. Debido al alto porcentaje de anticuerpos contra VHS-2 detectados en las trabajadoras del sexo del Paraguay, consideramos de suma importancia ampliar el numero de pacientes y comparar el ELISA con otras tècnicas serològicas.

Detecciòn de anticuerpos para el virus del Herpes simple tipo 1 y 2 (VHS 1 y 2), por el mètodo de Elisa en trabajadoras del sexo / Annual reports 1996 / Detection of antibodies for herpes simplex virus 1 and 2 by the Elisa method in sex workers

Las tècnicas màs comùnmente utilizadas para el diagnòstico de la infecciòn por el virus del herpes simple (VHS) son: aislamiento del virus en cultivo de tejidos, examinaciòn citològica, ensayos serològicos como inmunofluorescencia indirecta, radioinmunoanàlisis, fijaciòn de complemento, hemaglutinaciòn indirecta y el mètodo de ELISA. Los ensayos serològicos mencionados podrìan distinguir infecciones por VHS-1 del 2. El objetivo de este trabajo fue determinar la presencia de anticuerpos de tipo IgG e IgM para el VHS-1 y 2, utilizando una tècnica de ELISA, en trabajadoras del sexo. Para tal efecto fueron estudiadas 56 trabajadoras del sexo, provenientes de las ciudades de Encarnaciòn, Edelira y Ayolas. El 78,5 por ciento de la poblaciòn en estudio presentò anticuerpos contra el virus VHS-1 y el 91 por ciento para el VHS-2. El 71 por ciento presentò anticuerpos del tipo IGG y el 74,1 por ciento del tipo IgM para ambos serotipos virales, respectivamente. Nuestros hallazgos podrìan indicar o una especificidad del mètodo de ELISA utilizado para la discriminaciòn del VHS-1 del 2 o la existencia de co-infecciòn en las mujeres estudiadas. Debido al alto porcentaje de anticuerpos contra VHS-2 detectados en las trabajadoras del sexo del Paraguay, consideramos de suma importancia ampliar el numero de pacientes y comparar el ELISA con otras tècnicas serològicas

Queratitis herpética: correlación clínico-virológica / Herpetic keratitis: clinic-virological correlation

Patients and methods: Forty one patients with a clinical diagnosis of herpetic keratitis were studied. Viral isolation, polymerase chain reaction (PCR) and typification were done in a sample taken by swabbing the ocular lesion. Results: Twenty six patients (31 percent female) had epithelial keratitis, that was mild or moderate in 88 percent of cases and acute in 77 percent of them. In 20 patients (77 percent), viral isolation and PCR were positive (HSV-2 in one case). Fiften patients (67 percent female) had stromal keratitis, 93 percent of cases were moderate or severe and 53 percent were acute. Viral isolation was negative in all cases and in 20 percent PCR was positive. Conclusions: Viral isolation and PCR were equally sensitive in epithelial keratitis, but in stromal keratitis only PCR could detect the virus. Moderate acute dendrite was the predominant clinical manifestation. The higher proportion of women with stromal keratitis supports is possibly autoimmune etiology). HSV-2 is seldomly isolated and possibly associated to vertical transmission